الکتروفورز: اینکه چیست ، برای چه کاری است و چگونه انجام می شود
محتوا
الکتروفورز یک تکنیک آزمایشگاهی است که با هدف جداسازی مولکول ها با توجه به اندازه و بار الکتریکی آنها انجام می شود تا بتوان بیماری ها را تشخیص داد ، بیان پروتئین را تأیید کرد یا میکروارگانیسم ها را شناسایی کرد.
الکتروفورز روشی ساده و کم هزینه است که در کارهای معمول آزمایشگاهی و در پروژه های تحقیقاتی مورد استفاده قرار می گیرد. با توجه به هدف الکتروفورز ، انجام آزمایشات و معاینات دیگر برای رسیدن به یک تشخیص ممکن است لازم باشد.
این برای چیست
الکتروفورز می تواند برای اهداف مختلف ، هم در پروژه های تحقیقاتی و هم در تشخیص انجام شود ، زیرا این یک روش ساده و کم هزینه است.بنابراین می توان الکتروفورز را برای موارد زیر انجام داد:
- ویروس ها ، قارچ ها ، باکتری ها و انگلی ها را شناسایی کنید ، با این کاربرد بیشتر در پروژه های تحقیقاتی.
- تست پدری؛
- بیان پروتئین ها را بررسی کنید.
- به عنوان مثال جهش ها را شناسایی کنید ، زیرا در تشخیص سرطان خون مفید است.
- تجزیه و تحلیل انواع هموگلوبین در گردش خون ، مفید بودن در تشخیص کم خونی سلول داسی شکل.
- مقدار پروتئین موجود در خون را ارزیابی کنید.
با توجه به هدف الکتروفورز ، انجام آزمایشات تکمیلی دیگر برای پزشک برای تکمیل تشخیص ممکن است لازم باشد.
چگونه انجام می شود
برای انجام الکتروفورز ، ژل مورد نیاز است که می تواند بسته به هدف ، پلی اكریل آمید یا آگارز باشد ، بافر الكتروفورز و دیگ بخار ، نشانگر وزن مولكولی و یك رنگ فلورسنت ، علاوه بر تجهیزات نور UV یا LED ، به عنوان ترانس لومیتور نیز شناخته می شود.
پس از تهیه ژل ، باید یک شی specific خاصی قرار داده شود تا چاه ها در ژل ساخته شوند ، که به اصطلاح معروف به آن شانه گفته می شود و اجازه دهید ژل خودش را بگیرد. وقتی ژل آماده شد ، فقط مواد را روی چاه ها بمالید. برای این منظور ، باید یک نشانگر وزن مولکولی در یکی از چاه ها قرار گیرد ، یک کنترل مثبت ، که ماده ای است که شناخته شده است ، یک کنترل منفی ، که اعتبار واکنش را تضمین می کند و نمونه هایی که باید تجزیه و تحلیل شوند. همه نمونه ها باید با یک رنگ فلورسنت مخلوط شوند ، زیرا به این ترتیب می توان نوارهای موجود در دستگاه انتقال نور را تجسم کرد.
ژل همراه با نمونه ها باید در دیگ الکتروفورز قرار گیرد که حاوی محلول بافر مخصوص است و سپس دستگاه روشن می شود تا جریان الکتریکی و در نتیجه اختلاف پتانسیل وجود داشته باشد که برای ذرات جداسازی با توجه به آنها مهم است بار و اندازه زمان اجرای الکتروفورز با توجه به هدف روش متفاوت است و می تواند تا 1 ساعت طول بکشد.
پس از زمان مشخص شده ، می توان نتیجه جریان الکتروفورتیک را از طریق دستگاه روشناساز مشاهده کرد. هنگامی که ژل در زیر نور UV یا LED قرار می گیرد ، می توان الگوی باند را تجسم کرد: هرچه مولکول بزرگتر باشد ، کوچکتر می شود و به چاه نزدیکتر می شود ، در حالی که مولکول سبک تر ، ظرفیت مهاجرت بیشتر است.
برای تأیید واکنش ، نوارهای کنترل مثبت باید تجسم پیدا کنند و هیچ چیز نباید در کنترل منفی تجسم یابد ، زیرا در غیر این صورت این نشانه وجود آلودگی است و کل روند باید تکرار شود.
انواع الکتروفورز
الکتروفورز را می توان برای اهداف مختلف انجام داد و با توجه به هدف آن ، می توان از انواع مختلفی از ژل استفاده کرد که متداول ترین آنها پلی آکریل آمید و آگارز است.
الکتروفورز برای شناسایی میکروارگانیسم ها بیشتر در آزمایشگاه های تحقیقاتی انجام می شود ، با این حال ، برای اهداف تشخیصی ، می توان از الکتروفورز برای شناسایی بیماری های خون شناسی و بیماری هایی که با افزایش مقدار پروتئین ها تکامل می یابند ، انواع اصلی الکتروفورز:
1. الکتروفورز هموگلوبین
الکتروفورز هموگلوبین یک تکنیک آزمایشگاهی است که برای شناسایی انواع مختلف هموگلوبین در خون انجام می شود و امکان شناسایی وجود بیماری های مربوط به سنتز هموگلوبین را فراهم می کند. نوع هموگلوبین از طریق الکتروفورز در یک PH خاص ، در حالت ایده آل بین 8.0 تا 9.0 ، با یک الگوی باندهایی قابل مقایسه با الگوی طبیعی شناخته می شود ، و امکان شناسایی هموگلوبین های غیر طبیعی را فراهم می کند.
برای چه ساخته شده است: الکتروفورز هموگلوبین علاوه بر اینکه در افتراق تالاسمی مفید است ، برای بررسی و تشخیص بیماری های مرتبط با سنتز هموگلوبین مانند کم خونی سلول داسی شکل و بیماری هموگلوبین C انجام می شود. بیاموزید که چگونه الکتروفورز هموگلوبین را تفسیر کنید.
2. الکتروفورز پروتئین
الکتروفورز پروتئین معاینه ای است که پزشک برای ارزیابی میزان پروتئین های گردش یافته در خون و شناسایی بیماری ها درخواست می کند. این معاینه از یک نمونه خون انجام می شود که برای بدست آوردن پلاسما ، بخشی از خون که از مواد دیگر پروتئین است ، سانتریفیوژ می شود.
پس از الکتروفورز ، می توان الگویی از باندها را تجسم کرد و متعاقباً گرافی را که در آن مقدار هر کسر پروتئین نشان داده شده است ، تشخیص داد.
برای چه ساخته شده است: الکتروفورز پروتئین به پزشک این امکان را می دهد تا با توجه به الگوی باند و نمودار ارائه شده در گزارش معاینه ، میلومای مولتیپل ، کم آبی ، سیروز ، التهاب ، بیماری کبد ، پانکراتیت ، لوپوس و فشار خون را بررسی کند.
نحوه انجام آن و نحوه درک نتیجه الکتروفورز پروتئین را بفهمید.
توصیه می کنیم
چرا شین های من سرحال هستند و چگونه با آنها رفتار می کنم؟
